Gén rezistencie na karbapeném (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Meno Produktu
Detekčná súprava HWTS-OT045 génu rezistencie na karbapeném (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (Fluorescenčná PCR)
Epidemiológia
Karbapenémové antibiotiká sú atypické β-laktámové antibiotiká s najširším antibakteriálnym spektrom a najsilnejšou antibakteriálnou aktivitou.Vďaka svojej stabilite voči β-laktamáze a nízkej toxicite sa stal jedným z najdôležitejších antibakteriálnych liečiv na liečbu závažných bakteriálnych infekcií.Karbapenémy sú vysoko stabilné voči plazmidom sprostredkovaným β-laktamázam s rozšíreným spektrom (ESBL), chromozómom a plazmidom sprostredkovaným cefalosporinázam (enzýmy AmpC).
kanál
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Vnútorná kontrola | Vnútorná kontrola |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Technické parametre
| Skladovanie | ≤-18℃ |
| Čas použiteľnosti | 12 mesiacov |
| Typ vzorky | Spútum, čisté kolónie, rektálny výter |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤ 5,0 % |
| LoD | 103CFU/ml |
| Špecifickosť | a) Súprava deteguje štandardizované spoločnosti negatívne referencie a výsledky spĺňajú požiadavky zodpovedajúcich referencií. b) Výsledky testu skríženej reaktivity ukazujú, že táto súprava nemá skríženú reakciu s inými respiračnými patogénmi, ako sú Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxyobacterustoca, Haemcinet. junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiračný adenovírus, Enterococcus, alebo vzorky obsahujúce iné gény rezistencie voči liekom CTX, mecA, SME, SHV, TEM atď. c) Antiinterferencia: Mucín, minocyklín, gentamicín, klindamycín, imipeném, cefoperazón, meropeném, ciprofloxacín hydrochlorid, levofloxacín, kyselina klavulanová, roxitromycín sú vybrané na interferenčný test a výsledky ukazujú, že vyššie uvedené interferujúce látky nemajú žiadnu interferujúcu reakciu na detekciu génov rezistencie na karbapeném KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM a IMP. |
| Použiteľné nástroje | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems QuantStudio®5 systémy PCR v reálnom čase SLAN-96P Real-Time PCR Systems (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR systém LineGene 9600 Plus Real-Time PCR detekčný systém (FQD-96A,HangzhouBioer technológia) MA-6000 kvantitatívny tepelný cyklovač v reálnom čase (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 systém PCR v reálnom čase BioRad CFX Opus 96 systém PCR v reálnom čase |
Pracovný tok
Možnosť 1.
Odporúčané extrakčné činidlo: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ktorý možno použiť s automatickým extraktorom nukleových kyselín pre makro a mikrotest (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) od Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Pridajte 200 μl normálneho fyziologického roztoku do zrazenina talu.Nasledujúce kroky by sa mali riadiť pokynmi pre extrakciu a odporúčaný elučný objem je100 μl.
Možnosť 2.
Odporúčané extrakčné činidlo: Nucleic Acid Extraction or Purification Reagent (YDP302) od Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Extrakcia by sa mala začať presne v súlade s krokom 2 návodu na použitie (pridajte 200 μl pufra GA do zrazeniny talu a pretrepávajte, kým sa talus úplne nezavesí).Na elúciu použite vodu bez RNázy/DNázy a odporúčaný elučný objem je 100 μl.
Možnosť 3.
Odporúčané extrakčné činidlo: Macro & Micro-Test Sample Release Reagent.Vzorku spúta je potrebné premyť pridaním 1 ml normálneho fyziologického roztoku k vyššie uvedenému precipitátu talu, centrifugovať pri 13 000 ot./min. počas 5 minút a supernatant sa zlikviduje (ponechajte si 10-20 ul supernatantu).V prípade čistého tampónu z kolónií a konečníka pridajte 50 μl činidla na uvoľnenie vzorky priamo do vyššie uvedenej upravenej zrazeniny talu a následné kroky by sa mali extrahovať podľa návodu na použitie.
