1 Pozadie epidémie dengue: Eskalujúca globálna výzva verejného zdravia

Dengue je akútne vírusové ochorenie prenášané komármi spôsobené vírusom dengue (DENV), ktorý sa stal najrýchlejšie sa šíriacim arbovírusovým ochorením na celom svete a predstavuje značnú hrozbu pre verejné zdravie. Za posledné dve desaťročia sa celosvetový výskyt dengue dramaticky zvýšil, pričom počet hlásených prípadov sa od roku 2021 každoročne zdvojnásobuje [1]. V decembri 2023 Svetová zdravotnícka organizácia (WHO) vyhlásila globálny stav núdze v súvislosti s dengue s cieľom posilniť koordinované medzinárodné úsilie v reakcii. Epidemiologické odhady WHO naznačujú, že približne 3,9 miliardy jednotlivcov na celom svete je ohrozených infekciou dengue, pričom sa ročne vyskytne odhadom 390 miliónov infekcií – z ktorých 96 miliónov sa prejaví ako klinicky zjavné prípady [1,2].

2 epidemiologické hlavné body

Epidemiologické charakteristiky horúčky dengue sú formované interakciou virologických faktorov, ekológie vektorov, imunitných odpovedí hostiteľa a sociálno-environmentálnych podmienok. Komplexné pochopenie týchto charakteristík je nevyhnutné pre vývoj účinných stratégií prevencie a kontroly, ako aj presných diagnostických prístupov.

2.1 Vektory prenosu a vzorce prenosu v mestách

Vírus dengue sa prenáša primárneAedes aegypti a Aedes albopictuskomáre. Spomedzi týchto druhov prenášačov je Aedes aegypti považovaný za najdôležitejšieho prenosového vektora, ktorý sa vyznačuje vysokou „prispôsobivosťou pre ľudí“ a rozsiahlym rozšírením v tropickom a subtropickom mestskom prostredí. Na rozdiel od iných komárov prenášajúcich arbovírusové patogény vykazuje Aedes aegypti nasledujúce kľúčové epidemiologické charakteristiky:

-Preferovanie rozmnožovania v antropogénnom prostredí (napr. nádoby na vodu, vyradené pneumatiky)

-Silný tropizmus pre ľudskú krv ako zdroj živín

-Denné správanie pri kŕmení

Tieto znaky definujú horúčku dengue ako typické ochorenie„mestská infekčná choroba“s výrazne zvýšenou účinnosťou prenosu v husto osídlených oblastiach. Štúdie súvisiace s WHO preukázali, že v husto osídlených mestských prostrediach môže zvýšená frekvencia kontaktu komárov s človekom podstatne zvýšiť základné reprodukčné číslo (R₀) DENV, čím sa urýchli šírenie epidémií [2].

2.2 Globálne trendy šírenia a hnacie faktory

Podľa správ WHO sa celosvetový počet hlásených prípadov horúčky dengue za posledné dve desaťročia exponenciálne zvýšil [1,3]. Tento rastúci trend je spôsobený predovšetkým nasledujúcimi vzájomne prepojenými faktormi:

(1) Zmena klímy: Rastúce globálne teploty nielen rozširujú geografický rozsah vhodných biotopov pre prenášače komárov, ale tiež skracujú vonkajšiu inkubačnú dobu DENV v hostiteľskom komári, čím zvyšujú účinnosť prenosu. WHO potvrdila zmeny v hustote komárov vyvolané klímou ako spoľahlivý prediktor časopriestorovej dynamiky prepuknutia horúčky dengue.

(2) Urbanizácia: Rýchla a neplánovaná expanzia miest vytvorila bohaté biotopy pre rozmnožovanie komárov, zatiaľ čo zvýšená hustota obyvateľstva posilnila kontinuitu prenosových reťazcov DENV.

(3) Globálny pohyb populácie: Medzinárodné cestovanie a obchod uľahčili rýchly cezhraničný prenos dengue, čím podporili prechod z importovaných prípadov na trvalý lokálny prenos. Údaje zo sledovania WHO ukazujú, že medzi rokmi 2010 a 2021 Spojené štáty hlásili 7 528 prípadov dengue súvisiacich s cestovaním, z ktorých 3 135 si vyžadovalo hospitalizáciu a 19 viedlo k úmrtiu.

(4) Rozšírenie rozšírenia prenášačov: Celosvetovo sa geografický rozsah rozšírenia Aedes aegypti a Aedes albopictus naďalej rozširuje, pričom komáre Aedes sa čoraz viac usadzujú v niektorých častiach Európy. V dôsledku toho sa horúčka dengue vyvinula z tradične regionálnej epidémie na globálnu hrozbu pre verejné zdravie.

2.3 Mechanizmy multiserotypovej kocirkulácie a reinfekcie

Vírus dengue sa skladá zo štyroch antigénne odlišných sérotypov (DENV-1 až DENV-4). Infekcia jedným sérotypom poskytuje dlhodobú ochrannú imunitu proti tomuto špecifickému sérotypu, ale iba dočasnú a čiastočnú krížovú ochranu proti ostatným trom sérotypom. Všeobecná populácia je univerzálne náchylná na DENV, pričom klinické ochorenie sa vyvinie iba u podskupiny infikovaných jedincov [2].

V endemických oblastiach často cirkuluje viacero sérotypov DENV súčasne, čo vedie k tomu, že jednotlivci môžu počas svojho života prekonať viacero infekcií dengue. Epidemiologické štúdie WHO identifikovali ko-cirkuláciu viacerých sérotypov ako kľúčový faktor periodických prepuknutí dengue [1].

2.4 Sekundárna infekcia a zosilnenie závislé od protilátok

Kritickým a jedinečným javom v epidemiológii horúčky dengue jeprotilátkovo závislé zosilnenie (ADE)Počas sekundárnej infekcie heterológnym sérotypom DENV uľahčujú neneutralizujúce protilátky produkované počas primárnej infekcie vstup vírusu do monocytov a makrofágov, čím zvyšujú replikáciu vírusu. Tento mechanizmus je WHO všeobecne uznávaný ako hlavný patogénny faktor pri závažnej horúčke dengue, vrátane hemoragickej horúčky dengue a šokového syndrómu dengue [1].

Epidemiologické údaje WHO konzistentne ukazujú, že jedinci so sekundárnou infekciou dengue majú výrazne vyššie riziko vzniku závažného ochorenia v porovnaní s osobami s primárnou infekciou – čo je charakteristika, ktorá má veľký význam pre sledovanie ochorenia a klinickú liečbu. Je dôležité poznamenať, že hoci je riziko závažného ochorenia počas sekundárnej infekcie zvýšené, infekcia akýmkoľvek sérotypom DENV môže potenciálne viesť k závažnému priebehu dengue [1].

2.5 Nešpecifické klinické prejavy a riziko nesprávnej diagnózy

Klinické prejavy horúčky dengue sú pozoruhodne nešpecifické, najmä v skorých štádiách ochorenia, často sa prekrývajú s prejavmi iných vírusových infekcií prenášaných komármi (napr. vírusy chikungunya a Zika), ako aj niektorých respiračných infekcií. Odhady WHO naznačujú, že 40 – 80 % infekcií DENV je asymptomatických [3].

Medzi typické klinické prejavy patria:

-Akútna horúčka (pretrvávajúca 2 – 7 dní, ktorá môže byť dvojfázová)

- Silná bolesť hlavy a retroorbitálna bolesť (bolesť za očami)

-Bolesť svalov a kĺbov (bežne označovaná ako „horúčka zlomených kostí“)

-Makulárna alebo makulopapulárna vyrážka

- Mierne hemoragické prejavy (napr. ekchymóza, epistaxa, krvácanie ďasien)

Symptomatická dengue sa typicky delí na tri odlišné fázy: febrilnú fázu, kritickú fázu a fázu zotavenia. Približne menej ako 5 % symptomatických pacientov prejde do ťažkej formy dengue. Vzhľadom na nedostatok špecifických klinických znakov je diagnostika založená výlučne na klinických príznakoch náročná, čo zvyšuje riziko nesprávnej diagnózy a nedostatočnej diagnózy. WHO výslovne zdôrazňuje, že samotná klinická diagnóza nestačí na zabezpečenie presnosti, a preto je laboratórne potvrdenie nevyhnutné [1].

 3 kľúčové body z dokumentu WHO „Laboratórne testovanie vírusu dengue: Predbežné usmernenie, apríl 2025“

V apríli 2025 Svetová zdravotnícka organizácia vydala aktualizované predbežné usmernenia o laboratórnom testovaní na dengue (DENV), ktoré poskytujú smerodajné technické usmernenia pre globálnu diagnostiku dengue. Tieto usmernenia syntetizujú najnovšie dôkazy o laboratórnom testovaní dengue v kontexte prebiehajúcej globálnej núdzovej situácie v súvislosti s dengue a ponúkajú praktické odporúčania prispôsobené prostrediam s rôznou úrovňou zdrojov.

3.1 Základné princípy stratégie testovania

V usmernení sa zdôrazňuje, že diagnostika horúčky dengue musí využívať stratégiu kombinovaného testovania s viacerými markermi založenú na štádiu ochorenia [1]. Vzhľadom na absenciu univerzálneho diagnostického algoritmu by sa testovacie stratégie mali prispôsobiť lokálnym epidemiologickým kontextom s ohľadom na nasledujúce kľúčové faktory [1]:

-Štádium infekcie: Počet dní po nástupe príznakov určuje najvhodnejšiu metódu testovania

-Typ vzorky: Vhodnosť plnej krvi, plazmy alebo séra na detekciu DENV

-Regionálna epidemiológia: Lokálne cirkulujúce sérotypy DENV a spoločná cirkulácia iných arbovírusov

-Riziko koinfekcie: V oblastiach s prekrývajúcou sa cirkuláciou arbovírusu by sa malo zvážiť multiplexné testovanie na rozlíšenie medzi rôznymi patogénmi

3.2 Stratégia testovania založená na fázach

Podľa usmernení WHO by sa laboratórne testovanie na horúčku dengue malo riadiť jasnými časovými oknami na základe štádia ochorenia [1,2]:

(1) Testovanie akútnej fázy (≤7 dní po nástupe)

-Testovanie nukleových kyselín (molekulárne testovanie): Reverzná transkripcia-polymerázová reťazová reakcia (RT-PCR) a ďalšie molekulárne metódy detekujú DENV RNA s vysokou citlivosťou.

-Testovanie antigénu: Detekcia antigénu NS1, ktorý sa stáva detekovateľným do 1-3 dní od nástupu ochorenia.

Počas akútnej fázy sú hladiny virémie relatívne vysoké a testovanie nukleových kyselín a antigénov dosahuje optimálnu citlivosť.

(2) Testovanie v rekonvalescenčnej fáze (≥4 dni po nástupe ochorenia)

-Sérologické testovanie: Protilátky IgM sa zvyčajne stanú detekovateľnými okolo 4. dňa po nástupe ochorenia.

Vo väčšine prípadov protilátky IgM pretrvávajú 14 – 20 dní a v niektorých prípadoch môže pretrvávanie predĺžiť až na 90 dní.

Testovanie IgG má obmedzenú hodnotu pri diagnostike akútnej horúčky dengue kvôli možnej skríženej reakcii protilátok z predchádzajúcej infekcie flavivírusom alebo očkovania.

(3) Diagnostický algoritmus pre podozrivé prípady

Usmernenie obsahuje diagnostický algoritmus pre podozrenie na horúčku dengue, ktorý odporúča vhodné testovacie metódy na základe dní po nástupe príznakov: testovanie antigénu NS1 a testovanie nukleových kyselín sú primárnymi prístupmi v ranej fáze, zatiaľ čo sérologické testovanie je primárnou metódou v neskoršej fáze.

3.3 Hodnotenie a výber výkonnosti testovacej metódy

Podľa WHO je systematické hodnotenie výkonnosti a použiteľných scenárov rôznych testov na horúčku dengue nasledovné:

4 Odporúčania produktov na detekciu horúčky dengue pomocou makro a mikro testov podľa scenára

Na podporu prevencie a kontroly horúčky dengue poskytuje Macro & Micro-Test integrované diagnostické portfólio zahŕňajúce rýchly skríning, molekulárne potvrdenie a genomický dohľad, čím spĺňa potreby v rôznych fázach manažmentu ohnísk.

4.1 Scenár 1: Rýchly skríning a cielený dohľad

Platí pre kliniky diagnostikujúce horúčku, zariadenia primárnej zdravotnej starostlivosti, skríning komunity v prípade ohniska a karanténu v prístavoch/na hraniciach.

-Rýchly test na antigén vírusu dengue NS1: Detekuje skorú infekciu (1-3 dni po nástupe) s výsledkami do 15 minút pre rýchle triedenie.

-Test protilátok IgM/IgG proti vírusu dengue: Rozlišuje primárne/sekundárne infekcie s cieľom vyhodnotiť riziko závažného ochorenia.

Kombinovaný rýchly test na antigén NS1 vírusu dengue + IgM/IgG: Súčasne detekuje antigén a protilátky pre kompletnú diagnostiku.

-Test protilátok IgM/IgG proti vírusu Chikungunya: Umožňuje diferenciálnu diagnostiku s horúčkou dengue na presnú identifikáciu patogénov.

4.2 Scenár 2: Presná diagnostika a reakcia na núdzové situácie

-Súprava na detekciu nukleových kyselín vírusu dengue I/II/III/IV: Detekuje a rozlišuje 4 sérotypy (detekčný limit 500 kópií/ml) na sledovanie ohnísk nákazy.

-Lyofilizovaná PCR súprava na vírus dengue: Prenosná pri izbovej teplote, vhodná pre oblasti s obmedzenými zdrojmi a pri náhlych prepuknutiach nákazy.

- Súprava na multiplexnú PCR v reálnom čase pre vírusy dengue/zika/chikungunya: Súčasne deteguje 3 arbovírusy pre efektívnu diferenciálnu diagnostiku pri komplexných ohniskách nákazy.

Všetky vyššie uvedené činidlá sú kompatibilné s plne automatizovaným systémom AIO 800 Sample-to-Answer, čím sa znižuje manuálna obsluha a krížová kontaminácia a zvyšuje sa efektivita a biologická bezpečnosť.

4.3 Scenár 3: Genomický dohľad a analýza vírusovej línie

Platí pre národné referenčné laboratóriá, výskumné inštitúcie verejného zdravia, v súlade s postavením NGS zo strany WHO.

Riešenia genomického dohľadu od spoločnosti Macro & Micro-Test podporujú sekvenovanie celého genómu na sledovanie vírusov, objasnenie prenosového reťazca, monitorovanie variantov a úpravu stratégie očkovania. Podporujú manuálne/automatizované pracovné postupy, čím zlepšujú priepustnosť a reprodukovateľnosť a umožňujú laboratóriám prejsť z rutinného testovania na pokročilý dohľad v súlade s dôrazom WHO na posilnenie monitorovania vírusovej evolúcie.

4.4 Hodnota integrovaných riešení

Spoločnosť Macro & Micro-Test poskytuje kompletné diagnostické riešenia na detekciu arbovírusov a podporuje každú fázu manažmentu ohnísk: nástroje na rýchle skríning pre zdravotnícke zariadenia v prvej línii, molekulárne potvrdenie pre presnú diagnostiku a možnosti analýzy celého genómu pre epidemiologický dohľad. Vďaka vysokovýkonným testom, flexibilným pracovným postupom a platformám pripraveným na automatizáciu tieto riešenia umožňujú laboratóriám a systémom verejného zdravotníctva posilniť pripravenosť a reakciu na vznikajúce arbovírusové hrozby na celom svete.

Referencie

[1] Svetová zdravotnícka organizácia. Laboratórne testovanie vírusu dengue: Predbežné usmernenie, apríl 2025. Ženeva: Svetová zdravotnícka organizácia; 2025.

[2] Technická poradná skupina pre Globálnu iniciatívu WHO pre arbovírusy. Posilnenie globálnej pripravenosti a reakcie na hrozby arbovírusových ochorení: Výzva na akciu. Lancet Infect Dis. 2026;26(1):15-17.

[3] The Lancet Microbe. Prekonanie dilemy diagnostiky horúčky dengue. Lancet Microbe. 2025;6(7):101190.